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ELISA試劑盒的配制：對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀闡明書，留意每批的細(xì)節(jié)。在運用細(xì)胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地回收其間的細(xì)胞因子。依據(jù)每批闡明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。 通常待測抗原規(guī)范曲線的線性范圍的可通過將規(guī)范品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。ELISA試劑盒可利用規(guī)范的ELISA操作流程、擴大試劑盒、第三類試劑、或改動酶底物體系可在必定范圍內(nèi)進步靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度，主張孵育規(guī)范品和標(biāo)本。若運用過氧化物酶作為顯色體系，應(yīng)禁止在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
ELISA試劑盒的操作因固相載體的構(gòu)成不一樣而有所區(qū)別，國內(nèi)醫(yī)學(xué)查驗通常均用板式點。這篇文章將敘說板式ELISA各個操作步驟的留意關(guān)鍵，ELISA檢查試劑盒珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特別儀器合作運用。
可用作ELISA試劑盒測定的標(biāo)本非常廣泛，體液（如血清 ）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、大便）等均可作標(biāo)本以測定其間某種抗體 或抗原成份。ELISA試劑盒有些標(biāo)本可直接進行測定（如血清 、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如大便和某些分泌物）。這些標(biāo)本搜集的時刻、方法和保留都有必定的要求。
按ELISA試劑盒闡明書的要求預(yù)備實驗中需用的試劑。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水，包含用于洗刷的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液運用pH計丈量較正。從冰箱中取出的實驗用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后運用。試劑盒中本次實驗不需用的有些應(yīng)及時放回冰箱保留。